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Cultivo de bacterias anaerobias. Cámaras climáticas incubadoras

 

 

Las bacterias anaerobias son aquellas que requieren tensión de oxígeno reducida para su crecimiento, no se desarrollan en la superficie de medios de cultivo en atmósferas de aire normal (aerobiosis) ni en ambientes con 10% de CO2 (microaerofilia). Solamente se desarrollan en atmósferas anaerobias con 5-10% de H2, 5-10% CO2 y 80-90% de N2.


Los gérmenes anaerobios constituyen la mayor parte de la flora normal de piel, membranas mucosas, y tracto intestinal.

 

Las bacterias anaerobias pueden crecer en las placas de agar en una atmósfera sin O2, generalmente N2 al 80%, CO2 al 10% y H2 al 10%. El CO2 estimula el crecimiento y el H2 combinado con el O2 que pueda estar presente, sirven para mantener las condiciones anaerobias.


Si bien existen diversos tipos de bacterias anaerobias, clasificadas en función de la tolerancia al oxigeno, nos vamos a referir únicamente a las microaerofílicas, las cuales crecen en presencia de tensiones de oxigeno mínimas, que lo metabolizan utilizándolo como aceptor final de electrones. Es por ello que necesitan de atmósferas controladas de CO2.


Las bacterias anaerobias están ampliamente distribuidas en la naturaleza. Podemos diferenciar dos clases de medios de procedencia:


FUENTES EXOGENAS:

- El suelo.

- El agua: Lagos, sedimento de ríos, océanos, aguas cloacales.

- Alimentos.

- Tracto gastrointestinal de animales.


FUENTES ENDOGENAS:

Cuando se encuentran en el ser humano formando parte de la flora normal en piel y mucosas. En algunos lugares superan a los aerobios en una proporción de 1:1000.


En la mayoría de los casos la incubación, tanto de tejidos como de células, se realiza a una temperatura de 35 a 37 ºC, utilizándose cámaras climáticas de cultivos, las cuales tienen capacidad para trabajar con rango de temperaturas comprendido entre +5ºC y +50ºC, humedad relativa saturada al 98% y control de CO2 entre 0 y 20% de concentración.


El tiempo de incubación suele ser de 72 a 96 horas, ya que estos microorganismos, a diferencia de los aerobios, son de crecimiento lento. Es muy importante evitar la exposición al aire en los tránsitos.

 

Las cámaras climáticas, incubadoras, o estufas de cultivos, deben estar dotadas de medios de monitorización y registro de los parámetros ambientales programados, bien de forma directa, o a través de volcado de datos informáticos.

 

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